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多肽的分离纯化
2015-8-18
来源:互联网
点击数: 2739          作者:未知
  • 多肽是人体自身存在而且必需的活性物质,它广泛分布于人体各处,分子量在3000~1000Da之间,现在研究较多的多肽包括抗恶性肿瘤多肽、抗病毒多肽、抗菌肽、细胞因子模拟肽、诊断用多肽以及用于心血管疾病的多肽等等,多肽不仅可用作药物,还可用作保健食品。

    多肽的来源

    多肽的来源有天然提取,合成肽和重组肽三种。大多数多肽都是化学合成的,只有非常少的多肽是来源于天然提取,更大的肽一般指超过25个氨基酸需要通过重组DNA的技术表达生产。

    Superdex Peptide 多肽分离纯化专用

    Superdex peptide专门分离多肽类产品的高分辨率分子筛凝胶,分离的分子量范围为100-7000Da,多肽的分子量大小恰好落在此范围内,因此可以通过分子量的区别来进行分离。图中展示的是用Superdex Peptide PE 7.5/300来分离不同分子大小的肽类。


    离子交换层析


    当分离的多肽带有电荷的时候,可以选择用离子交换的方法进行分离,通常离子交换会和RPC及凝胶过滤层析配合在一起去分离复杂的样品,如酶解多肽片段或者合成多肽以及天然来源的多肽。下图为通过Q sepharose HP分离两个分子量差别很小的肽。显示用阴离子交换分离X肽和其前体x-k肽,它们之间的差异是x-k在c端多了一个lysine。

    反相层析


    多肽耐有机溶剂,多肽的可溶性通常是pH依赖性的,有些多肽的分离需要在很高的pH值条件下才能成功分离,SOURCE RPC 是以******技术合成的超低压快速反相层析凝胶,在高pH值下依然非常稳定,可提供高分辨的中度和精细纯化。图中显示在碱性条件下用SOURCE 30 RPC分离检测仅仅相差一个氨基酸的多个血管紧张肽。

    多肽提取小贴士


    · 多肽的紫外吸收通常在206nm-220nm,如果含有芳香族的基团,紫外的吸收******值会在268nm-280nm.

    · Sephadex G-10通常用于对合成多肽的******步脱盐。

    · 上述不同的层析方法可以交替使用获得更纯的多肽。

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